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高效液相色谱仪色谱柱使用要注意哪些事项
点击次数:148 发布时间:2021-08-20
  色谱柱是高效液相色谱仪的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性,延长柱子的使用寿命非常重要。因此对高效液相色谱仪色谱柱的维护是关键。
  高效液相色谱仪色谱柱是消耗品,因此尽可能地仔细使用会延长色谱柱的寿命。
  1、色谱柱使用前注意事项
  色谱柱的储存液无特殊说明均为评价报告所示的流动相。在使用前一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。如胺基(NH2)氰基(CN)柱均为正相条件下评价,所以如果使用条件为反相条件时,请用一中介流动相(如异丙醇)。
  先置换掉柱内的储存液,然后再应用反相条件对于C18固定相采用的是甲醇-水为评价流动相,若要使用含盐浓度较高的流动相,使用前请用超纯水或甲醇含量相对较低的甲醇-水顶替掉原来的评价流动相,否则会对色谱柱造成极大的伤害,将会明显地减少色谱柱使用寿命。
  2、色谱的使用方向
  高效液相色谱仪色谱柱标签上的箭头所示方向是评价时流动相流动的方向,使用过程相流动的方向也按此方向。
  3、流动相
  流动相中所用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱,或至是分析纯试剂配流动相水Z好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45或0.22m的滤膜过滤一次则更好,这一点对含盐的流动相尤为重要。另外装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。总之,必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。
  4、样品
  样品也要尽可能的清洁,同样可选用样品过滤器或样品预处理(SPE柱)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时,如无特殊要求,所有的溶剂和样品应严格脱水。
  5、PH值
  以常规硅胶为基质的键合相填料高效液相色谱柱通常的PH值适用范围是2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界(特别是在8.0≤PH≤10.0时)条件下使用高效液相色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于高效液相色谱仪色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
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