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液相色谱维修

  • 型   号:Agilent 1200 HPLC
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Agilent 1200 HPLC液相色谱仪维修二元高压泵/ 四元泵 在线真空脱气机 自动进样器/自动进样温控(选件) 柱温箱 检测器( DAD,VWD, FLD,RID) Chemistation 工作站

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液相色谱维修介绍
二元高压泵/ 四元泵
在线真空脱气机
自动进样器/自动进样温控(选件)
柱温箱
检测器( DAD,VWD, FLD,RID)
Chemistation 工作站

一)压力异常

 操作压力的变化往往是故障的征兆。
A、没有压力显示,没有流动相流动:

      原 因                             解决方法
1、电源问题                           接通电源,开机
2、保险丝被烧坏                        更换保险丝
3、控制器设定不正确或设定失败            采取恰当的设定、、修理或更换控制器
4、柱塞杆折断                         更换柱塞杆
5、泵头内有空气                       溶剂脱气、启动泵抽出空气
6、流动相不足                         补充流动相、更换入口滤头
7、单向阀损坏                         更换单向阀
8、漏液                              拧紧或更换手紧接头

B、流动相流动正常,但没有压力显示:
           原 因                      解决方法
1、仪表损坏                            更换仪表
2、压力传感器损坏                       更换压力传感器

C、压力持续偏高
           原 因                       解决方法
1、流速设定过高                        调整流速设定
2、柱前筛板堵塞                    反冲色谱柱、更换筛板、更换色谱柱
3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀    使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆。
4、色谱柱选择不当                      选择恰当的色谱柱
5、进样阀损坏                         清洗或更换进样阀
6、柱温过低                           提高温度
7、控制器失常                         修理或更换控制器
8、保护柱阻塞                            清洗或更换保护柱
9、在线过滤器阻塞                        清洗或更换在线过滤器

D、 压力持续偏低:
            原 因                     解决方法
1、流速设定过低                          调整流速
2、系统漏液                           确定漏液位置并维修
3、色谱柱选择不当                      选择恰当的色谱柱
4、柱温过高                            降低温度
5、控制器失常                          维修或更换控制器

E、 压力波动:
           原 因                      解决方法
1、泵中有气体                        溶剂脱气、从泵中除去气体
2、单向阀损坏                         更换单向阀
3、泵密封损坏                         更换泵密封
4、脱气不充分                         重新过滤一遍、溶剂脱气
5、系统漏液                           确定漏液位置并维修
6、使用梯度洗脱                  由于流动相粘度的变化引起的压力波动

 
二) 漏  液
   通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题,就必须将接头取下,检查是否损坏(例如,卡套损坏、密封表面有杂质);损坏的接头应该更换掉。
A)接头处漏液
原 因 解决方法
1、接头松动 拧紧
2、接头磨损 更换
3、接头过紧 拧松,再重新拧紧、更换
4、接头被污染 拆下清洗、更换
5、部件不匹配 使用同一品牌的配件
B)泵漏液
原 因 解决方法
1、单向阀松动 拧紧单向阀(不必拧的过紧)、更换单向阀。
2、接头松动 拧紧接头(不必拧的过紧)
3、混合器密封损坏 更换混合器密封、更换混合器。
4、泵密封损坏 维修或更换泵密封件
5、压力传感器损坏 维修或更换压力传感器
6、脉冲阻尼器损坏 更换脉冲阻尼器
7、比例阀损坏 检查隔膜,如果漏液立即更换、检查手紧接头,损坏的立即更换
8、放空阀的损坏 拧紧放空阀、更换放空阀
C)进样阀漏液
原 因 解决方法
1、转子密封损坏 重新安装或更换进样阀
2、定量环阻塞 更换定量环
3、进样口密封松动 调整
4、进样针头尺寸不合适 使用恰当的进样针
5、废液管中产生虹吸 保持废液管高于废液液面
6、废液管阻塞 更换或疏通废液管
D)色谱柱漏液
原 因 解决方法
1、尾端接头松动 拧紧接头
2、卡套内有填料 拆下、清洗卡套、重新安装
3、筛板厚度不合适 使用合适的筛板
E)检测器漏液
原 因 解决方法
1、流通池垫片损坏 更换垫片、避免过大的背景压力(压力降)
2、流通池窗破碎 更换窗口
3、手紧接头漏液 拧紧或更换
4、废液管阻塞 更换废液管
5、流通池阻塞 重新安装或更换
 
三)谱图问题
   液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。
A)峰拖尾
原 因 解决方法
1、筛板阻塞 反冲色谱柱、更换进口筛板、更换色谱柱
2、色谱柱塌陷 填充填料至色谱柱中
3、干扰峰 改变流动相或更换色谱柱
4、流动相PH选择错误 调整PH值,一般在3-7
5、样品与填料表面的溶化点发生反应 加入离子对或碱性修饰剂、更改色谱柱
6、柱外效应 调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)使用小体积的流通池
7、二级保留效应,反相模式 加入三乙胺(碱性样品)、加入乙酸(或酸性样品)、加入盐缓冲剂(离子化样品)换柱
8、缓冲液不合适 使用浓度20-100mM的缓冲液、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
B)峰前延
原 因 解决方法
1、柱温低 升高柱温,一般为25-40度,不得超过60度
2、样品溶剂选择不恰当 使用流动相作为样品溶剂
3、样品过载 降低样品含量
4、色谱柱损坏 更换新柱
C)峰分叉
原 因 解决方法
1、分析柱污染 可能是柱子污染,再生;入口可能被阻塞,拆下来清洗必要时更换色谱柱。
2、样品溶剂不溶于流动相 采取流动相作为样品溶剂。
D)峰变形
原 因 解决方法
1、样品过载 减少样品载量
2、样品溶剂选择不恰当 减少进样体积、运用低极性样品溶剂
E)额外的峰
原 因 解决方法
1、样品中有其他组份 正常
2、前一次进样的洗脱峰 增加运行时间或梯度斜率、提高流速
3、空位或鬼峰 检查流动相是否纯净、使用流动相作为样品溶剂、减少进样体积
F)保留时间波动
原 因 解决方法
1、温控不当 调好柱温
2、流动相组分变化 防止变化(蒸发、反应等)
3、色谱柱没有平衡 在运行前给予足够的时间平衡色谱柱
4、流速变化 重新设定流速
5、泵中有气泡 从泵中除去气泡
3、流动相选择不恰当 更换合适的流动相、选择合适的混合流动相

G)基线漂移
原 因 解决方法
1、柱温波动。 控制好柱子和流动相的温度
2、流动相不均匀或纯度不高 使用HPLC级的溶剂、高纯度的盐及添加剂、重蒸水、流动相在使用前进行脱气
3、流通池被污染或有气体 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池
4、检测器出口阻塞 取出阻塞物或更换管子
5、流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速
6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 更改流动相时,平衡半小时
7、流动相污染、变质 检查流动相的组成、重新配制
8、样品中有强保留的物质以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。 重新用水及甲醇清洗柱,除去强留份。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 将波长调整至最大吸收波长处
H)基线噪音
原 因 解决方法
1、在流动相、检测器或泵中有空气 流动相脱气。强极性溶剂冲洗系统除去气。
2、漏液 检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。
3、流动相混合不完全 用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂
4、温度影响(柱温过高) 减少差异、稳定时间长一点
5、在同一条线上有其他电子设备 检查干扰是否来自于外部,加以更正。
6、泵振动 在系统中加入脉冲阻尼器
7、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 检查流动相的组成。
8、流动相各溶剂不相溶 选择互溶的流动相
9、检测器/记录仪电子元件的问题 断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。
10、流通池污染 清洗流通池
11、检测器灯能量不足 更换灯
12、色谱柱填料流失或阻塞 更换色谱柱
13、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 维修或更换混合器
I)宽峰
原 因 解决方法
1、流动相组成变化 重新制备新的流动相
2、流动相流速太低 调节流速
3、漏液(特别是在柱子和检测器之间) 检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。
4、检测器设定不正确 调整设定
5、柱外效应影响:柱子过载;检测器对反应时间或池体积响应过大;柱与检测器间管路太长或管路内径太大 小体积进样、减少响应时间或使用更小的流通池、使用内径为0.007-0.01的短管路、减少响应时间
6、缓冲液浓度太低 增加浓度
7、色谱柱污染或失效,塔板数较低 更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。
8、柱入口塌陷 打开柱入口,填补塌陷或更换柱子
9、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 选择其它类型的色谱柱以改善分离效果
10、柱温过低 提高柱温。温度不宜超过60℃
12、检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
J)所有的峰面积都太小
原 因 解决方法
1、检测器衰减设定过高或过低 减少或增加衰减的设定
2、检测器时间常数设定太大 设定较小的时间常数
3、进样量太少或太多 增大或减少进样量
4、记录仪连接不当 使用正确的连接

四)进样阀的问题

以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。
A)手动进样阀,转动不灵
原 因 解决方法
1、转子密封损坏 更换或调整转子密封
2、转子太紧 调整转子的松紧度
B)手动进样阀,载样困难
原 因 解决方法
1、进样阀安装不当 重新安装
2、定量环阻塞 清洗或更换定量环
3、进样器污染 清洗或更换进样器
4、管路阻塞 清洗或更换管路

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